檢測過程中,該芯片首先根據(jù)細胞大小,利用磁場高效去除肺癌患者血樣中的白細胞,精準捕獲CTCs,并使其形成單細胞陣列。隨后采用納米電穿孔技術(shù),將一種新型四面體熒光探針快速準確地遞送至活細胞內(nèi),實現(xiàn)對PD-L1基因調(diào)控的即時檢測。此外,通過與免疫T細胞共培養(yǎng),芯片還能原位分析CTCs的增殖及表型變化,并將這些細胞行為與基因表達異質(zhì)性進行深度關(guān)聯(lián)分析?!癗ICHE芯片集成了單細胞生物技術(shù)領(lǐng)域的多項前沿技術(shù),使得檢測又快又準。”常凌乾說。
常凌乾認為,當前肺癌診斷面臨的最大挑戰(zhàn),在于現(xiàn)有方法無法在全時空范圍內(nèi)準確預(yù)測患者是否適合接受特定的免疫療法。如何準確評估腫瘤特征,以實現(xiàn)對免疫治療效果的精準預(yù)測,成為提升免疫治療效率亟須攻克的難題。
“納米電穿孔技術(shù)則是利用直徑五六百納米的通道,將電場精準引導(dǎo)到細胞上,基因探針可瞬間遞送至細胞內(nèi)。”常凌乾說,相比傳統(tǒng)方法,這一技術(shù)將檢測時間從數(shù)小時縮短至1秒鐘內(nèi),同時保證了探針遞送的準確性。
據(jù)國家癌癥中心公布的數(shù)據(jù),2022年,我國惡性腫瘤新發(fā)病例數(shù)為482.47萬例。惡性腫瘤已經(jīng)成為嚴重威脅中國人群健康的主要公共衛(wèi)生問題之一。
一般而言,腫瘤治療的難易程度并非單純由腫瘤大小決定,關(guān)鍵在于是否存在有效的靶向藥物。在常凌乾看來,活檢手段的優(yōu)勢在于能彌補影像學(xué)的不足,直接檢測患者的基因信息,從而判斷是否適用特定靶向藥物。
在微小芯片上構(gòu)建完整的生物實驗環(huán)境,離不開芯片實驗室技術(shù)?!霸跈z測到細胞內(nèi)部基因變化后,芯片能夠進一步通過單細胞操控技術(shù)在CTCs旁放置免疫細胞,并進行實時連續(xù)的活細胞觀察?!背A枨f,這一創(chuàng)新設(shè)計使研究者能實時觀察免疫細胞與腫瘤細胞的相互作用,以判斷患者是否適合免疫治療,讓臨床預(yù)測準確率從約60%提升至90%以上。
為全面評估NICHE芯片在臨床上預(yù)測免疫治療效果的準確性,常凌乾團隊聯(lián)合北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院收集了80名非小細胞肺癌患者的外周血,通過檢測證明了該芯片捕獲CTCs并鑒定其基因和行為表型的能力。團隊還對部分患者進行了長時間的用藥監(jiān)測,證實了該芯片在長期監(jiān)測中的適用性。
北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院副院長吳楠介紹,目前,醫(yī)院正積極與常凌乾團隊合作,努力構(gòu)建一項旨在篩選肺癌免疫治療潛在受益者的行業(yè)標準。雙方計劃開展大規(guī)模臨床試驗,以期推動肺癌治療的個性化進程,有效減輕患者的醫(yī)療負擔。
“NICHE芯片在大規(guī)模應(yīng)用過程中面臨的主要挑戰(zhàn)是操作復(fù)雜且成本高昂?!背A枨寡裕琋ICHE芯片集成了光鑷技術(shù)、微流控技術(shù)等,并配套使用光顯微鏡等高端設(shè)備,用它進行檢測的成本相較于傳統(tǒng)組織活檢等手段顯著增加。為此,團隊正探索在細胞操控、檢測及培養(yǎng)環(huán)節(jié)降低成本。
“在臨床工作中,我們目前主要依賴影像學(xué)和活檢手段評估腫瘤狀況,進而制定個性化的免疫治療策略。”常凌乾介紹,影像學(xué)在腫瘤檢測中發(fā)揮了重要作用,但僅能在腫瘤發(fā)展到一定階段、形態(tài)明顯變化后才可以檢測。該手段只反映腫瘤大小,無法直接評估腫瘤的良惡性、基因突變狀況以及是否適合靶向治療。
但這種方式同樣存在局限性。活檢通過手術(shù)或穿刺獲取患者少量腫瘤組織,染色后觀察其基因突變情況。這種方法雖然直接,但腫瘤內(nèi)部細胞的異質(zhì)性使得單一樣本難以全面反映整個腫瘤的真實情況。
為實現(xiàn)對單細胞的精準操控,團隊采用了光鑷技術(shù)結(jié)合微流控技術(shù),實現(xiàn)對單細胞的精確捕獲、移動與分離。這樣能確保從患者樣本中精準提取出CTCs等目標細胞,同時有效剔除紅細胞、白細胞等非目標細胞,讓捕獲效率由原來的90%提高到98%,為后續(xù)檢測奠定堅實基礎(chǔ)。
南宫ng28官网下载近日,北京航空航天大學(xué)生物與醫(yī)學(xué)工程學(xué)院教授常凌乾團隊成功研發(fā)一款名為NICHE的新型納米醫(yī)療芯片。該芯片可以快速檢測肺癌循環(huán)腫瘤細胞(CTCs)內(nèi)PD-L1基因表達和腫瘤細胞響應(yīng)免疫細胞的行為表型,并進一步對源自患者的CTCs進行亞群劃分,為肺癌患者提供更精準的免疫治療方案。相關(guān)研究論文發(fā)表在《美國國家科學(xué)院院刊》上。
當前,肺癌患者臨床診斷面臨的最大難點是什么?NICHE芯片如何助力精準免疫治療?其應(yīng)用前景如何?記者采訪了相關(guān)專家。
面對臨床挑戰(zhàn),常凌乾團隊研發(fā)的NICHE芯片集CTCs捕獲、基因檢測與細胞行為分析功能于一身,展現(xiàn)了極高的檢測速度與精度。
在眾多腫瘤治療手段中,免疫治療因其顯著療效和創(chuàng)新性,于2013年被《科學(xué)》雜志評為年度十大科學(xué)突破之一。特別是免疫檢查點抑制劑(如PD-1/PD-L1抑制劑),可以有效阻斷免疫抑制通路,增強機體抗癌能力。然而,在臨床實踐中,僅有部分患者能從免疫治療中獲益,這一療法的普適性與精準度尚待提升。
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作者: 井岡山 🛺
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